
大鼠主动脉内皮细胞的分离培养
方法:分离大鼠主动脉,直接贴壁于培养皿中,荧光倒置显微镜观察细胞形态,免yi组化Ⅷ因子相关抗原染色鉴定细胞.结果:约24小时组织块边缘有游离的 新生细胞长出,7天即融合成片.消化传代后细胞呈短梭形或三角形,单层生长,铺路石状,Ⅷ因子表达阳性,呈指数增殖.冻存后复苏细胞活性均超过90%.结 论:用贴壁法成功建立了大鼠血管内皮细胞体外培养方法,冻存细胞存活率高,为体外研究提供了稳定的模型.





透射电镜观察自噬小体方法
利用光学显微镜,借助相应的染色方法,可以观察细胞凋亡时会出现的一系列形态特征。常用的染色法包括台盼蓝、橙 / 化乙啶(AO/EB)、Giemsa 和 HE 法等。在光学显微镜下可以观察到核固缩、质浓缩和凋亡小体等典型的凋亡现象。
电镜形态学观察法是一种比较经典、可靠的方法,被认为是确定细胞凋亡的金标准。电镜下凋亡细胞表现为染色质凝集、核浓缩、核裂解、胞浆收缩和胞膜具有发泡现象及凋亡小体出现等。
细胞培养中常见的生物污染包括细菌污染、霉菌污染、支原体污染、黑点污染、真菌污染和原生动物污染。这些污染在细胞培养中的特点及相应的解决办法如下:
1.细菌污染
细菌在普通倒置显微镜下呈黑色和细砂状。根据gan染菌的种类不同,可能会呈现不同的形状,培养液一般会变得浑浊、黄色,对细胞生长有明显影响。
解决方法:仔细检查器具的灭菌情况,确保通风时间和高压灭菌器的压力是否足够。重要的是,与培养基接触的移液管等物品如果被污染两次,则可能会导致储存溶液也受到污染。所以一定要注意!下次使用前要检查培养基的浑浊度。此外,建议在培养基中添加抗生su。
