公司新闻
细胞冻存的步骤
信息来源:www.njyhsw.cn    发布时间:2021.12.29

配制含 10%DMSO 或甘油、10~20% 小牛血清的冻存培养液;
取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用 PBS 清洗。
去除 PBS,加入适量胰蛋白酶 (覆盖培养皿表面) 把单层生长的细胞消化下来;
离心 1000rpm5min;
去除胰蛋白酶,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节冻存液中细胞的终密度为 5×106/ml~1×107/ml;
将细胞分装入冻存管中,每管 1~1.5 ml;
在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;
冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱 2h ,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。